Визначення ботанічного походження меду за допомогою плр

Мед - складне багатоскладне речовина, що отримується в результаті ферментативної обробки квіткового нектару медоносної бджолою. Хімічний склад і біологічні властивості меду залежать від джерела нектару, тому важливо знати його ботанічне походження. За ботанічному походженням мед можна розділити на моно- (нектар переважно одного виду рослин) і поліфлорний (немає переважання якого-небудь нектару) [3]. Зараз сорт меду визначають фізико-хімічними методами [2], за допомогою меліссопалінологіческого (пилкового) [1] і органолептичного (ГОСТ Р 52451-2005, ГОСТ Р 19792-2001) аналізів. Однак пилковий аналіз тривалий за часом і вимагає особливої ретельності виконання. Результати пилкового і органолептичного аналізів залежать від кваліфікації і досвіду експерта, тому останнім часом набуває поширення аналіз за допомогою полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР). Запропоновано декілька методик виділення ДНК рослин-медоносів з меду і її видоспецифічності ампліфікації [4, 5, 7], проте подібні роботи для медоносів Росії відсутні. Мета даного дослідження полягала в розробці способу, що дозволяє встановити ботанічне походження меду за допомогою ПЛР на прикладі медоносів середньої смуги Росії.

Як джерело ДНК використовували зразки різних сортів меду. ДНК виділяли за такою методикою. Протягом 1 ч розчиняли 7,5 г меду в 40 мл дистильованої води кімнатної температури при постійному перемішуванні. Далі центрифугировали 30 хв при 5000 об / хв, осад суспендують в 1 мл води, переносили в нову центрифужную пробірку і брали в облогу 5 хв при 15000 об / хв. З отриманого осаду виділяли ДНК з допомогою набору «сорбіт-ГМО-Б» відповідно до рекомендацій виробника (ЗАТ «Синтол», Росія). З рослин виділяли ДНК сольовим методом [6]. Отриману ДНК додатково очищали за допомогою набору для виділення ДНК з агарозного гелю і реакційних сумішей (компанія «Цитокін», Росія), після чого зберігали в 1хТЕ-буфері при -20С. Концентрацію та якість ДНК визначали на приладі «NanoDrop 1000» (Thermo Scientific, США).

Відео: ЧОМУ МЕД кристалізується? ЯКІСТЬ МЕДУ І КРИСТАЛЛИЗАЦИЯ!

Повноцінно встановити сорт і якість меду можна тільки за сукупними результатами органолептичного, біохімічного, пилкового і ДНК-аналізу. Пропонований в даній статті спосіб визначення ботанічного походження меду може прискорити процес аналізу та паспортизації того чи іншого зразка. Відносна простота (в порівнянні з пилкових аналізом) дозволяє застосовувати ДНК-діагностику в широкій практиці контролю якості медової продукції.

О.І.МАШКОВ, А.В.ПОСКРЯКОВ,
А.Г.НІКОЛЕНКО, Р.Р.ГАРАФУТДІНОВ

ФГБНУ «Інститут біохімії і генетики
Уфимського наукового центру Російської академії наук »
450054, м Уфа, проспект Жовтня, буд. 71

анотація. Описано спосіб встановлення ботанічного походження меду за допомогою ПЛР для найбільш продуктивних медоносів середньої смуги Росії: липи серцеподібної, гречки посівної, соняшника однорічного, а також дудника лікарського, буркуну лікарського і таволги вязолистной. На шести Монофлорний і трьох поліфлорного зразках меду продемонстрована можливість використання ПЛР для визначення ботанічного походження меду. ПЛР-аналіз одного із зразків гречаного меду не підтвердив його сортову приналежність, що показує практичну значимість запропонованого способу.

Ключові слова: Мед, медоноси, липа, гречка, соняшник, ДНК, ПЛР.

ЛІТЕРАТУРА
1. Курманов Р.Г., Ішбірдін А.Р. Меліссопалінологія. - Уфа, 2014.
2. Castro-Vázquez L., Díaz-Maroto M.C., González-Vinas M.A., Pérez-Coello M.S. Differentiation of monofloral citrus, rosemary, eucalyptus, lavender, thyme and heather honeys based on volatile composition and sensory descriptive analysis // Food Chemistry. - 2009. - V. 112 (4).
3. de Gouveia Mendes C., da Silva J.B.A., de Mesquita L.X., Maracajá P.B. As análises de mel: Revisão // Revista Caatinga. - 2009. - V. 22 (2).
4. Lalhmangaihi R., Ghatak S., Laha R., Gurusubramanian G., Kumar N.S. Protocol for optimal quality and quantity pollen DNA isolation from honey samples // J. Biomol. Techniques. - 2014. - V. 25.
5. Mafra I., Silva S.A., Moreira E.J., da Silva C.S.F., Beatriz M., Oliveira P.P. Comparative study of DNA extraction methods for soybean derived food products // Food Control. - 2008. - V. 19.
6. Miller S.A., Dykes D.D., Polesky H.F. A simple salting out procedure for extracting DNA from human nucleated cells // Nucleic Acids Res. - 1988. - V. 16.
7. Soares S., Amaral J.S., Oliveira M.B.P., Mafra I. Improving DNA isolation from honey for the botanical origin identification // Food Control. - 2015. - V. 48.
8. Untergasser A., Cutcutache I., Koressaar T., Ye J., Faircloth B.C., Remm M., Rozen S.G. Primer3 - new capabilities and interfaces // Nucleic Acids Research. - 2012. - V. 40 (15).

ВІДОМОСТІ ПРО АВТОРІВ:
Машков Олег Ігорович, канд. біол. наук, наук. співр. лабораторії фізико-хімічних методів аналізу біополімерів, e-mail: Ця електронна адреса захищена від спам-ботів. У вас повинен бути включений jаvascript для перегляду., тел. +7 (347) 235-60-88-
Поскряков Олександр Віталійович, канд. біол. наук, ст. науч. співр. лабораторії біохімії адаптивності комах, e-mail: Ця електронна адреса захищена від спам-ботів. У вас повинен бути включений jаvascript для перегляду., тел. +7 (347) 235-60-88-
Ніколенко Олексій Геннадійович, д-р біол. наук, проф., зав. лабораторією біохімії адаптивності комах, e-mail: Ця електронна адреса захищена від спам-ботів. У вас повинен бути включений jаvascript для перегляду., тел. +7 (347) 235-60-88, сот. +7 (960) 807-58-93-
Гарафутдинов Равіль Ринатович, канд. біол. наук, зав. лабораторією фізико-хімічних методів аналізу біополімерів, e-mail: Ця електронна адреса захищена від спам-ботів. У вас повинен бути включений jаvascript для перегляду., тел. +7 (347) 235-60-88.

DETERMINATION OF THE BOTANICAL ORIGIN OF HONEY BY PCR

Відео: Як визначити якість меду будинку

O.I.Mashkov, A.V.Poskryakov, A.G.Nikolenko, R.R.Garafutdinov

This paper describes a method of establishing a botanical origin of honey by means of polymerase chain reaction for the most honey productive plants of central Russia - tillet (Tilia cordata), common buckwheat (Fagopyrum esculentum), sunflower (Helianthus annuus), angelica (Angelica archangelica), sweetclover (Melilotus officinalis) and meadowsweet (Filipendula ulmaria). It was demonstrated the possibility of PCR to determine the botanical origin on nine samples of honey (six monofloral, three multifloral). PCR analysis of samples of buckwheat honey did not confirm its identity of breed, which shows the practical significance of the proposed method.

Відео: Як перевірити якість меду + мука + цукор .. = мед не відрізниш ....

Keywords: honey, honey plant, tillet (Tilia cordata), common buckwheat (Fagopyrum esculentum), sunflower (Helianthus annuus), DNA, PCR.

Поділися в соц мережах:

Увага, тільки СЬОГОДНІ!

Схожі