Формування мікобіоти продуктів бджіл
Склад мікофлори повітря біля поверхні землі в більшій мірі визначається місцевими джерелами суперечка мікроміцетів. Значна частина їх потрапляє в повітря з дикорослих рослин. Більш ймовірно, що джерелом суперечка служить поверхнева мікофлора - цвілі, паразити рослин і інші гриби, що живуть на рослинах або на поверхні грунту, забезпечені спеціальними механізмами, за допомогою яких вони можуть викидати свої суперечки в рухомі шари повітря. Відомо також, що в грунті з грибів переважають Пеницилл і аспергілли, а в повітрі панують суперечки грибів Сladosporium (Ф.Грегорі, 1964- S.Oliveri, E.Cammaraca, A.M.Greco et al., 1986). Так як в повітряному шарі біля поверхні землі (рівень розташування вуликів) склад повітряних суперечка визначається надходженням їх з місцевих джерел (рослини, грунт), випливає, що забруднення продуктів бджільництва спорами грибів неминуче.Мета наших досліджень - вивчення мікофлори повітря і можливість її впливу на формування мікобіоти продуктів бджіл.
Дослідження проводили 27 червня 2007 року на пасіці ТОВ «Тайговий мед» Залесовского району Алтайського краю. Відбір проб продуктів бджіл і мікологічні дослідження повітря виконували одночасно. Для дослідження контамінації спорами мікроміцетів повітря на пасіці використовували природне осідання суперечка в чашки Петрі зі стерильною селективної середовищем Сабуро. Чашки встановлювали безпосередньо на дах вулика, тобто на висоті 1,0-1,2 м від землі, з 11 до 12 год дня в п`яти точках на території пасіки. Зразки пилкової обніжжя відбирали з пильцеуловітелей, пергу, стільниковий мед і прополіс - з гнізд бджіл.
Для вивчення мікобіоти продуктів бджільництва - пилкової обніжжя, перги, меду і прополісу - готували розведення: 10 г продукту на 90 мл стерильного фізіологічного розчину - і висівали вглиб агаризованому середовища Сабуро.
Інкубування посівів проводили при 24 ° С протягом 14 діб. Виросли колонії мікроміцетів враховували на 3-ю добу для дріжджових організмів і на 5, 7, 10, 14-а доба для гіфальних грибів з наступним перерахунком отриманих середніх чисел на 1 г досліджуваного зразка. Виросли колонії за допомогою бінокулярної лупи поділяли на пологи за морфологічними особливостями. Кілька колоній кожного типу виділяли в чисту культуру і пересівали на агар Чапека. Видову ідентифікацію виділених ізолятів проводили на підставі комплексу культуральних і морфологічних ознак по определителям (Н.М.Підоплічко, 1972, 1977- В.І.Білай і ін., 1988- Д.Саттон і ін., 2001).
Велика кількість представників виду визначали за процентним вмістом ізолятів одного виду по відношенню до загальної кількості ізолятів, виявлених при посіві продуктів бджіл.
Відео: Дивовижний світ бджіл
Видову структуру мікобіоти вивчених продуктів бджіл характеризували по частоті представників виділених видів і їх домінування. Частоту народження (%) визначали за часткою зразків, в яких виявлено даний вид, від загального числа проаналізованих. Частоту домінування (%) оцінювали за часткою зразків, в яких даний вид перевищував 30% загальної чисельності, від загальної чисельності проаналізованих зразків.
Порівняльний аналіз мікобіоти проводили, розраховуючи індекс видової подібності за Серенсену
2С / (A + B),
де С - число загальних видів в порівнюваних ценозах- А і В - число видів в кожному з ценозів.
Методом осідання на чашки Петрі з повітря було виділено 1384 ізоляту мікроміцетів, що належать 12 видів, які були віднесені до 10 родів. Найбільша кількість ізолятів належало сімейству Dematiaceae - 89,53% і тільки 10,47% - до сімейства Moniliaceae. Максимальна кількість спор грибів належало роду Cladosporium - 86,4% (C. cladosporioides - 77,74%, C. herbarum - 8,67%). Спори грибів цього роду легко отделяютcя від конидиеносцев при зіткненні з дрібними крапельками туману (Ф.Грегорі, 1964). Необхідно відзначити, що напередодні відбору проб з 6 до 9 год 30 хв на пасіці і в її околицях спостерігався густий туман. У невеликих кількостях були виявлені ізоляти видів Stemphylium botruosum - 5,13%, Fusarium chlamydosporum - 3,54%, Alternaria alternata - 2,67%. Частка інших ідентифікованих 7 видів варіювала від 0,07% - Penicillium verruculosum до 0,87% - Aureobasidium pullulans.
Цікаво, що кількісна характеристика мікофлори повітря біля густого, високого травостою майже в 20 разів була вище, ніж на відкритому просторі, де трава скошена. В основному кількість наростало за рахунок спор грибів роду Cladosporium. Кількість осіли спор грибів Alternaria і Stemphylium не залежало від місця забору проби, суперечки ж едафітних грибів пологів Aspergillus, Penicillium, Fusarium і Mucor, а також епіфітних дріжджоподібних грибів пологів Trichophyton і Aureobasidium осідали тільки в певному місці.
Вивчення видового складу мікобіоти продуктів бджіл показало, що мікобіоти пилкової обніжжя на 66,7% відображає видовий склад мікофлори повітря, перги - на 58,3%, меду - на 50,0% і найменше (33,3%) в прополісі, тобто можна зробити висновок, що від поживних і фізико-хімічних властивостей субстрату залежить збереження спор певних видів мікроміцетів. Якщо в пилкової обніжжю домінували (71,4%) спори грибів Cladosporium, то в прополісі домінували (69,5%) Penicillium. У продуктах бджільництва збільшувалася видове різноманіття едафітних грибів пологів Aspergillus (5 видів) і Penicillium (3 види). У мікобіоти прополісу 83,3% припадало на спори грибів цих родів, де основна частка (82,05%) належала увазі P. thomi. Крім цього, ідентифіковані в мікофлори повітря види Stemphylium botryosum, Mucor racemosus, Exserohilum rostratum, що входять до складу мікобіоти обніжжя, перги і меду, що не зустрічалися в мікофлори прополісу. Тому можна сказати, що хоча на контамінацію продуктів бджіл мікофлора повітря і впливала, але все ж її формування залежить від властивостей самого продукту (Г.П.Чекрига, 2007). Кількісна характеристика контамінації продуктів бджіл мікроміцетами також підтверджує залежність виживання спор від субстрату, в даному випадку від виду продукту. Найбільша чисельність мікроміцетів (392 КУО / г) виявлено в пилкової обніжжю, майже в 6 разів менше в перзі, меду і прополісі.
Порівняння видового складу мікроміцетів по Серенсену показало, що найбільшу схожість мікобіоти повітря спостерігається з мікобіоти пилкової обніжжя (К = 33), меду (К = 30), перги (К = 29) і мікобіоти (К = 21) прополісу.
В результаті проведеної роботи можна зробити висновки, що загальним для вивчених складів мікобіоти продуктів бджіл і повітря пасіки ТОВ «Тайговий мед» Залесовского району Алтайського краю наприкінці червня 2007-року є 100% -ва зустрічальність виду Cladosporium cladosporioides, частота домінування якого склала 60, 0%.
Присутність в пилкової обніжжю, перзі, прополісі і меду таких видів, як Alternaria alternata, Stemphylium botruosum, Exserohilum rostratum, Mucor racemosus, Trichophyton terrestre, виділених і в мікофлори повітря, також підтверджує потрапляння мікроміцетів в продукти бджільництва з повітря.
Відео: Пасіка натуральних бджола продуктів
Незважаючи на те що забруднення мікроміцетами продуктів бджільництва тісно пов`язане з перебуванням їх в повітрі, основною умовою виживання спор є властивості самого продукту.
Найбільше видове схожість мікобіоти повітря спостерігалося з мікобіоти пилкової обніжжя (К = 33), іншими словами, мікобіоти пилкової обніжжя може служити індикатором, що характеризує мікоценози певної місцевості, в даному випадку місця розташування пасіки.
Г.П.ЧЕКРИГА, К.Я.МОТОВІЛОВ
Державна наукова установа
«Сибірський науково-дослідний
і проектно-технологічний інститут переробки сільськогосподарської продукції
СО Россельхозакадеміі »
(ГНУ СібНІПТІП), Новосибірська обл., М Краснообск
