Способи стерилізації в біотехнології
Відео: Посадка рослин на середу (на базі агару)
Всі роботи з культурою клітин і тканин in vitro проводять в стерильних (асептичних) умовах в стерильному боксі або ламінар-боксі, стерильними інструментами, в стерильному посуді, на стерильних живильних середовищах. У разі порушення стерильності на середовищах добре розвиваються мікроорганізми (гриби, бактерії), що порушують склад середовища і пригнічують ріст рослинних експлантів.
Відео: як наповнювати пробірки і чашки агаровим середовищем урок 4 від funnymushroomschool
Найчастіше для стерилізації приміщень (боксів для пересадки тканин, культуральних кімнат) використовують ультрафіолетове опромінення протягом 0,5-2 годин (в залежності від площі приміщення). Роботи в опроміненому приміщенні починають через 15-20 хвилин після відключення бактерицидних ламп, так як під дією ультрафіолетового випромінювання двоатомний кисень повітря стає триатомним озоном - газом, токсичним для людини. Для досягнення максимальної стерильності перед обробкою УФ все поверхні ретельно відмиваються миючими засобами, водою і розчинами хлорвмісних речовин, поверхні ламінар-боксу обробляють 96% спиртом.
Посуд, халати, вату, папір, дистильовану воду, поживні середовища стерилізують в автоклавах під тиском пара 1-2 атмосфери і температурою 120оС протягом 20-60 хв, в залежності від обсягу стерилізується матеріалу.
Відео: Введення в культуру in vitro розторопші плямистої
Колби, штативи з середовищем, вату, папір, халати перед автоклавуванням загортають в целофанову папір, або поміщають в бюкси.
Металеві інструменти автоклавувати не можна, так як під дією пара утворюється іржа. Тому їх стерилізують сухим жаром в термостатах з температурою 170-250оС протягом 1-2 годин або на окритія полум`я пальника, що також не ієни ефективно.
